目的:研究苍术的道地性,为质量标准提供依据。

方法:对不同产地的样品进行挥发油的GC/MS分析和抗菌实验。

结果:同一苍术居群,甚至同一植株的叶形和分裂与否及深浅、头状花序大小等表现出多变;不同产地(居群)苍术根茎中挥发油组分相差较大;北苍术挥发油的主要成分为p一按叶油醇或件按叶油醇和苍术酮的棍合物(30%以上);南苍术挥发油的主要分为茅术醇(61.85%)、p一按叶油醇(19.79%);发现苍术酮为茅苍术中主要成分(29.54%)。

太白、黄龙、罗田苍术挥发油对乙链球菌的最小抑制浓度(MCI)几乎是围场、茅山的1000倍,与链霉素、青霉素相同。结论:苍术tAarcytl喇eslancea(hTunb.)DC.是一个受地理环境影响很大的复合体,划分独立的特征变化很大,很难在实际工作中采用,故建议以道地名称命名异域变种以便于有针对性地选用;挥发油成分和抗菌作用均因产地不同而有显著的差别。  

评价苍术道地性或建立质量标准必须联系用途,单纯以挥发油含量高低来评价难免有失偏颇,而且挥发油含量和主要组分因地理环境的差异而变异很大,药效可能随之改革,单纯“以量取药”,也欠准确。以上问题是迄今苍术质量研究所未涉及或涉及甚少但又十分重要的方面,本研究对5个不同产地苍术的植物形态多样性、挥发油的含量和化学组分、挥发油的抑菌作用进行了比较研究,探讨中药材产地因素对质量的影响,择地而用是有科学道理的。生物多样性观察作者在北纬31。一480、东经107”一123.5’的广大范围内,对野生居群进行详细的观察,对5个产地,205份标本的31个性状进行测量,记录如表1。

《中国药典笋31规定中药苍术的基原为菊科植物茅苍术Aarc咧诚:l。,cae(Thunb.)Dc.或北苍术A.。ihen,is:(Dc.)Kiodz.的干燥根茎。《中国植物志》〔4〕在观察了大量标本基础上,将A.。hiensni,并人A.lancae。表1所列的形态变化,更证明《中国植物志》的处理是·正确的。此外,还发现苍术既可生长在向阳山坡疏林下,又可以生长在少见阳光的密林下,两种生态环境导致叶片的质地和分裂与否及分裂的程度不同,提示叶的薄厚和分裂与生境有关。

另一方面,苍术药材商品历来有南、北之分,更有茅山苍术的道地讲究,在药材的性状和药效上是有差别的,建立异域变种既符合分类学上自然的野生类群建立等级的观点,又能恰当地标示药材的质量。因此,苍术A.lancea是一个形态多变,受地理环境影响很大的复合体(原变种),茅苍术A.zanceavar.刀,aosnanensi:HuetFengined.是其中一个自然的野生类群,与邻近的湖北所产罗田苍术A.zanceasubsp,zuotsanensi:HuetFengined.(秦岭以南,南苍术的代表种)不同:植株和花序均较小,根茎细瘦,断面放置后很少有“白霜”(茅术醇)析出,由于茅山附近植物资源和生态环境破坏严重,茅苍术已很难找到,当地已有20余年没有药材收购,传统的茅苍术商品已不复存在,对茅苍术给特别的命名,就是要提醒学术界高度重视这是一个高度濒危的珍稀药用植物种质资源,应当加以保护,否则真正的“茅苍术”将永远地从地球上消失。曾经采用过的北苍术拉丁名A.zacea(Thunb.)DC.var.hci-nensis(Bunge)Kitam.可以作为秦岭以北异域变种的名称继续使用。2挥发油分析2.1仪器:岛津GC一7AG气相色谱仪,ChormatopaeC一EIB数据处理机。GC一MS:pye一204气相色谱仪,VGMM一7070H质谱仪,KY一GC/MSDSZ型数据系统。2.2挥发油的提取方法:药材样品均直接采自产地,水蒸气蒸馏提取。2.3分析条件:SE一54石英毛细管色谱柱(30mx0.32mm),柱温60℃一220℃,4℃m/in;气化室温度240℃:载气为氮气,柱前压49kPa;检测器IFD;分流比40:1;进样量0.15,0.15,0.15,0.巧和0.18拌L。用峰面积归一化法计算各化合物的相对百分含量。GC一MS:载气为氦气,柱前压68.6kpa,挥发油进样量0.05,0.03,0.25,0.19和0.10拌L,其余条件同GC。质谱分辨率500,电离方式El,电子能量70eV,离子源温度200℃,加速电压4kV,扫描速度15d/eC,扫描范围20一360amu。2.4分析结果:见表2。研究分析了江苏茅山周围金坛、句容、丹徒三县的苍术样品,均以苍术酮(atractyloen)为主要组分,而以往文献称南、北苍术均不含苍术酮,并作为与白术和关苍术相区别的化学特征,究其原因,所用“茅苍术”可能实际上是从湖北流通到江苏。

3体外抑菌试验3.1菌种:表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、甲型(A)溶血性链球菌、乙型(B)溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种、浅黄奈瑟氏球菌,由本所提供。3.2菌液制备:每种菌以接种环挑取同类型菌落4一5个,接种于营养肉汤内,35℃孵育4一6h后,以营养肉汤校正浓度达3.0亿菌/毫升左右,再以营养肉汤作104稀释,使菌浓度为3000一5000菌/毫升。3.3最小抑菌浓度(MIC)测定:以微量加液器将灭菌营养肉汤加人%孔圆底培养板中,每孔0.lmL。在第1列分别依次加人营养肉汤、溶剂、5个产地苍术挥发油、青霉素、链霉素,每孔各0.lmL,而后用微量加液器作2倍递减浓度稀释,最后1孔取出0.lmL弃去。然后接种稀释菌液,其中留一列孔作为药液对照。一列为培养基对照,一列为菌液对照。以微量振荡器混匀后,置35℃温孵20h,在黑色背景下观察判断结果。有细菌生长孔呈现混浊,未见混浊则为无细胞生长,以无细菌生长的药物最低浓度作为该药对该试验菌的最小抑菌浓度(MIC)。对每种菌的MIC以相差两个稀释度为有显著性差别的标准。结果见表3。表3不同产地苍术挥发油体外最小抑菌浓度《MI)C比较

4.1挥发油的含量和组分与地理环境的综合影响有关,而与单一因子如海拔、纬度无明显
的直接关系(见表4)。初步认为北苍术挥发油以各按叶油醇为主;罗田苍术挥发油以茅术
醇为主;茅山苍术以苍术酮为主,以苍术酮区别苍、白术的观点[5一“〕需要修正。

   生境类型:A中温带亚干早区+褐土+灌丛;B南温带亚干旱区+黄绵土十灌丛;C南温带亚湿润区十棕壤+灌丛;D北亚热带湿润区+黄棕壤+灌丛;E北亚热带湿润区十黄棕壤十疏林。4.25个产地苍术挥发油对乙型链球菌的抑菌MCI相差最显著:罗田、太白、黄龙最强,丹徒、围场最弱。按对每种菌的MIC值由小到大积分总体评价5种产地苍术挥发油抑菌作用,由强到弱排序依次为太白、黄龙、罗田、围场、丹徒。既然同一苍术居群、甚至同一植株的叶形、头状花序大小等表现出多变的特点,就不足以把南、北苍术定为独立的种;不同产地(居群苍术根茎中挥发油组分相差较大:不同产地苍术的抗菌活性差异显著(太白、黄龙、罗田苍术挥发油对乙链球菌的MIC几乎是围场、茅山的1倍,与链霉素、青霉素相当)。根据以上3方面的差异,命名茅苍术A.lancea(Thunb.)DC.var.mao认anensi:HuetFengined.(江苏茅山)、罗田苍术A.lancea(Thunb.)De.,usbp.zuotia,ensi:HuetFengs。ed.(秦岭以南,南苍术的代表种)、北苍术A.zancea(Thunb.)DC.var.认inensi:(Bunge)Kitam.(秦岭以北)等3个异域变种是必要而实用的。